微生物NMT解決方案
微生物NMT解決方案
一、視頻資源
二、參考文獻
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Hexavalent chromium induced oxidative stress and apoptosis in Pycnoporus sanguineus
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Electrical Phenotypes of Calcium Transport Mutant Strains of a Filamentous Fungus, Neurospora crassa
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Osmotic adjustment and requirement for sodium in marine protist thraustochytrid
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Ion transport and osmotic adjustment in Escherichia coli in response to ionic and non-ionic osmotica
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Turgor regulation in the osmosensitive cut mutant of Neurospora crassa
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Ionic currents and ion fluxes in Neurospora crassa hyphae
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三、常測哪些指標
Cd2+、Cu2+、Pb2+、NH4+、O2、H+、 K+、 Na+、Ca2+
四、檢測這些離子流、分子流，有什么生物學意義
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2）科研案例
以硅藻為材料，研究硅的有效性對硅藻金屬敏感性的影響。發現硅饑餓嚴重影響了對鎘、銅和鉛的耐受性。多個證據表明富硅細胞比缺硅細胞具有更高的金屬吸附和內流速率。富硅細胞通過提高細胞膜和液泡金屬轉運體的表達和抗氧化活性，清除金屬應激產生的活性氧，從而對金屬毒性做出響應。
Zhou B, Ma J, Chen F, et al. Mechanisms underlying silicon-dependent metal tolerance in the marine diatom Phaeodactylum tricornutum.?Environ Pollut. 2020;262:114331.
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2）科研案例
研究了城市污水中新出現的污染物CTAC對小球藻F1068細胞（人工去除EPS-R）和自然包覆EPS（EPS-C）對NH4+轉運和吸收的影響。結果表明，去除EPS可促進NH4+的轉移和吸收，但EPS的存在使NH4+保持不變，并有效地減弱了CTAC（b0.5mg/L）對NH4+吸收的能力，為藻類EPS在未來基于藻類的污水處理應用中在共存的有毒物質的轉移和吸收養分中的作用提供了見解。
Li F, Kuang Y, Liu N, Ge F. Extracellular polymeric substrates of Chlorella vulgaris F1068 weaken stress of cetyltrimethyl ammonium chloride on ammonium uptake.?Sci Total Environ. 2019;661:678-684.
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1）O2生理功能概述
2）科研案例
以小球藻為材料，研究了其對微培養（5種不同的微孔深度，四種直徑水平）的細胞反應。結果表明，O2的流速隨著深度從10μm增加到100μm逐漸升高，但隨著深度加深到200μm，氧氣流速迅速降低，這實際上是細胞生理學和密度的綜合結果。綜上所述，直徑/深度比約為1的微孔中的細胞具有最高的比生長率和氧流量。模擬還表明，在直徑與深度比較高的微孔中，傳質效果更好。
Zhang P, Xiao Y, Li Z, Guo J, Lu L. Microalgae in Microwell Arrays Exhibit Differences with Those in Flasks: Evidence from Growth Rate, Cellular Carotenoid, and Oxygen Production.?Front Plant Sci. 2018;8:2251. Published 2018 Jan 10. doi:10.3389/fpls.2017.02251
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2）科研案例
利用NMT技術測定鹽脅迫下，卷邊樁菇的兩種菌株MAJ和NAU的Na+、K+、Ca2+和H+的動態變化。在短期鹽處理和長期鹽處理下，兩種菌株Na+外流明顯增加，尤以NAU菌絲更加加明顯。卷邊樁菇菌絲的抑制劑的敏感性研究顯示，兩種菌株Na+外排源于Na+/ H+逆向轉運。在瞬時鹽處理下，兩種菌株都有很強的減少K+外流的能力。在非鹽脅迫下，兩種菌株顯示穩定的Ca2+內流。因此推斷，在鹽脅迫下，卷邊樁菇真菌所富含的Ca2+有助于宿根共生體通過增強Na+外排和減緩K+流失來協助宿主植物保持離子平衡的。
Li J, Bao S, Zhang Y, et al. Paxillus involutus strains MAJ and NAU mediate K(+)/Na(+) homeostasis in ectomycorrhizal Populus x canescens under sodium chloride stress.?Plant Physiol. 2012;159(4):1771-1786. doi:10.1104/pp.112.195370
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五、可以檢測哪些樣品
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1、動物樣品
1）細胞
神經細胞、腫瘤細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等
2）組織器官
腫瘤、皮膚、胃黏膜、胰島、腦（海馬體等）、胚胎（大鼠、魚）、斑馬魚皮膚/鰓、耳蝸、心臟（香螺）、卵（魚、雞蛋、爪蟾）、骨骼、角膜、脊椎（豚鼠）、肌肉組織（肌纖維、心?。?/p>
3）其它動物樣品
珊瑚、螨蟲、昆蟲（果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽）、蝌蚪、水蛭、藍蟹（微感毛）、變形蟲、水絲蚓
2、植物樣品
1）營養器官
莖：邊材、心材、微管形成層、木質部
2）生殖器官
花：花瓣、花瓣表皮細胞、花粉
種子：整體、胚
果實：果殼、果皮、果肉（蘋果、柑橘）、籽粒、棉花纖維、棉桃
3）細胞：植物懸浮細胞、液泡
4）愈傷組織
3、微生物樣品
酵母細胞、菌絲、菌落、微藻、細菌（大腸桿菌）
4、其它生物樣品
周叢生物
5、非生物樣品
金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫藥材料
六、樣品需要做哪些前處理
非損傷微測技術最大的特點就是活體、無損檢測，因此動植物材料在檢測前，不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。
1、動物單細胞
因NMT是活體檢測，故從培養箱中拿出來后，置于培養皿中，直接檢測即可
2、動物組織
因NMT是活體檢測，無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外，如斑馬魚皮膚離子細胞、側線毛細胞，直接檢測即可。如檢測部位位于體內，需在檢測時暴露出檢測部位（可采用麻醉的方式），后檢測即可。
3、植物根莖葉等組織器官
天然暴露在外的組織器官，例如根、莖、葉的表面，無需任何處理，直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養均可。
4、植物原生質體/液泡
因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測，檢測時不接觸樣品，故原生質體、液泡需要從組織或者細胞中，提取出來后檢測。
5、植物葉片的表皮細胞、葉肉細胞、鹽腺細胞、保衛細胞
無需提前處理。因這些細胞處于組織內部，故檢測時采用撕取等方式，暴露出相應細胞即可。
6、植物花粉管
離體萌發：在培養皿中萌發一段時間后即可直接檢測；在體萌發：將柱頭置于培養皿中，待萌發一段時間后即可直接檢測。
7、植物果實
無需提前處理。如待測部位位于果實內部，需在檢測前暴露出相應部位即可。
8、植物懸浮細胞
無需提前處理。檢測時，置于培養皿中檢測即可。
七、有哪些檢測方式？
即瞬時處理，是指在檢測過程中，在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液（PEG或甘露醇等溶液）的處理方法，目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下，樣品短時間內的離子/分子的變化趨勢，即短時效應。
2、預處理/提前處理好后檢測
是指在干旱脅迫一段較長的時間后（數十分鐘/數小時/數天），觀察植物離子/分子進出的情況，即長時效應。
八、檢測環境是空氣還是溶液
檢測時，只要求待測部位浸于溶液中（無需整體都浸在溶液里）。
九、樣品是如何檢測的
十、可以送樣檢測嗎
可以送樣檢測。目前非損傷微測技術測試服務由中關村NMT產業聯盟統籌管理，由遍布全國的22家NMT創新平臺服務中心，提供檢測服務。點擊獲取測試服務
