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                  水淹脅迫研究NMT解決方案

                  水淹脅迫研究NMT解決方案

                   

                  一、視頻資源

                  二、參考文獻

                  C2018-056,張建華、劉鷹高,香港中文大學、山東農業大學,Plant journal,水稻,胚芽鞘,Ca2+

                  Natural variation in the promoter of rice calcineurin B‐like protein10 (Os CBL 10) affects flooding tolerance during seed germination among rice subspecies

                  C2018-001,許衛鋒/張建華,福建農林大學/香港中文大學,Plant Physiology,根,H+/Ca2+/H2O2

                  Comparative analysis of Arabidopsis 26 ecotypes reveals a role for brassinosteroids in root hydrotropism

                   

                  C2015-023,許衛鋒/張建華,中科院南京土壤研究所/香港中文大學,J EXP BOT,根,H+

                  Involvement of 14-3-3 protein GRF9 in root growth and response under PEG-induced water stress

                  三、常測哪些指標

                  Ca2+、H+、H2O2、K+

                  四、檢測這些離子流、分子流,有什么生物學意義

                  • 1)Ca2+生理功能概述

                    2)科研案例

                    利用非損傷微測技術檢測了兩個水稻栽培品種Low88和Up221胚芽鞘以及距離胚芽鞘尖端不同距離部位的Ca2+流速,結果顯示兩個品種直接的Ca2+流速存在差異。結合基因表達量測定、GUS等實驗結果,表明,水稻萌發過程中對淹水脅迫的適應與兩種不同的OsCBL 10 啟動子有關,這反過來又影響了OsCBL 10 在不同品種中的表達,并對OsCIPK 15 的蛋白質積累及其下游級聯產生負面影響。

                    Ye NH, Wang FZ, Shi L, et al. Natural variation in the promoter of rice calcineurin B-like protein10 (OsCBL10) affects flooding tolerance during seed germination among rice subspecies. Plant J. 2018;94(4):612-625.

                     

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                  • 1)H+生理功能概述

                    2)科研案例

                    實驗材料分為野生型擬南芥(WT)、GRF9缺陷突變組(grf9)以及GRF9超表達組(OE),利用NMT檢測了根部H+的流動。流速結果顯示,GRF9促進了水脅迫條件下,擬南芥根部伸長區、根毛區H+的外排。結合嫁接實驗數據和對長勢的觀察,表明在水脅迫條件下,GRF9通過激活質膜H+-ATPase、促進根部生長區域分泌H+,并且加強地上部分有機物向根部分配,從而調節植物應對水脅迫。這一結論也合理解釋了水脅迫條件下相比于地上部分,根部生長更為旺盛的原因。

                    He Y, Wu J, Lv B, et al. Involvement of 14-3-3 protein GRF9 in root growth and response under polyethylene glycol-induced water stress. J Exp Bot. 2015;66(8):2271-2281.

                     

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                  • 1)K+生理功能概述

                    2)科研案例

                    利用非損傷微測技術,檢測兩種不同基因型的大麥NN和TX根部次生代謝產物對細胞膜離子轉運過程的影響。水淹敏感的大麥品種NN被三種一元羧酸和三種石碳酸處理都能引起穩定的K+外流,并伴隨著H+內流,但是在耐澇品種TX的根細胞中沒有K+的顯著改變?;谒幚韺W實驗和膜電勢的結果,提出了一個解釋次級代謝物對膜轉運活性影響的模型,為以后的研究和育種提供新的方法。

                    Pang J, Cuin T, Shabala L, Zhou M, Mendham N, Shabala S. Effect of secondary metabolites associated with anaerobic soil conditions on ion fluxes and electrophysiology in barley roots. Plant Physiol. 2007;145(1):266-276.

                     

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                  五、可以檢測哪些樣品

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                  1、動物樣品

                  1)細胞

                  神經細胞、腫瘤細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等

                  2)組織器官

                  腫瘤、皮膚、胃粘膜、胰島、腦(海馬體等)、胚胎(大鼠、魚)、斑馬魚皮膚/、耳蝸、心臟(香螺)、卵(魚、雞蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉組織(肌纖維、心?。?/p>

                  3)其它動物樣品

                  珊瑚、螨蟲、昆蟲(果蠅幼蟲的腸、蟑螂血腦屏障、按蚊、長紅錐蝽)、蝌蚪、水蛭、藍蟹(微感毛)、變形蟲、水絲蚓

                  2、植物樣品

                  1)營養器官

                  根:、根毛、根瘤*

                  莖:邊材、心材、微管形成層、木質部

                  葉:表皮細胞、葉肉細胞、鹽腺細胞、保衛細胞

                  2)生殖器官

                  花:花瓣、花瓣表皮細胞、花粉

                  種子:整體、胚

                  果實:果殼、果皮、果肉(蘋果、柑橘)、籽粒、棉花纖維、棉桃

                  3)細胞:植物懸浮細胞、液泡

                  4)愈傷組織

                  3、微生物樣品

                  酵母細胞、菌絲、菌落、微藻、細菌(大腸桿菌)

                  4、其它生物樣品

                  周叢生物

                  5、非生物樣品

                  金屬、混凝土、泥沙、納米材料、生物醫藥材料

                  六、樣品需要做哪些前處理

                  非損傷微測技術最大的特點就是活體、無損檢測,因此動植物材料在檢測前,不需要任何的液氮速凍、染色、研磨處理等。

                  1、動物單細胞

                  因NMT是活體檢測,故從培養箱中拿出來后,置于培養皿中,直接檢測即可

                  2、動物組織

                  因NMT是活體檢測,無需提前處理。如檢測部位天然暴露在外,如斑馬魚皮膚離子細胞、側線毛細胞,直接檢測即可。如檢測部位位于體內,需在檢測時暴露出檢測部位(可采用麻醉的方式),后檢測即可。

                  3、植物根莖葉等組織器官

                  天然暴露在外的組織器官,例如根、莖、葉的表面,無需任何處理,直接檢測即可。水培、土培、砂培、平板培養均可。

                  4、植物原生質體/液泡

                  因NMT是基于微傳感器/探針的非損傷檢測,檢測時不接觸樣品,故原生質體、液泡需要從組織或者細胞中,提取出來后檢測。

                  5、植物葉片的表皮細胞、葉肉細胞、鹽腺細胞、保衛細胞

                  無需提前處理。因這些細胞處于組織內部,故檢測時采用撕取等方式,暴露出相應細胞即可。

                  6、植物花粉管

                  離體萌發:在培養皿中萌發一段時間后即可直接檢測;在體萌發:將柱頭置于培養皿中,待萌發一段時間后即可直接檢測。

                  7、植物果實

                  無需提前處理。如待測部位位于果實內部,需在檢測前暴露出相應部門即可。

                  8、植物懸浮細胞

                  無需提前處理。檢測時,置于培養皿中檢測即可。

                  七、實驗時有哪些檢測方式?

                  1、實時處理 /瞬時處理后檢測

                  即瞬時處理,是指在檢測過程中,在正常測試液中瞬間加入所需的干旱脅迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的處理方法,目的是為了觀察瞬間干旱脅迫下,樣品短時間內的離子/分子的變化趨勢,即短時效應。

                  2、預處理/提前處理好后檢測

                  是指在干旱脅迫一段較長的時間后(數十分鐘/數小時/數天),觀察植物離子/分子進出的情況,即長時效應。

                  八、檢測環境是空氣還是溶液

                  檢測時,只要求待測部位浸于溶液中(無需整體都浸在溶液里)。

                  九、樣品是如何檢測的

                  十、可以送樣檢測嗎

                  可以送樣檢測。目前非損傷微測技術測試服務由中關村NMT產業聯盟統籌管理,由遍布全國的22家NMT創新平臺服務中心,提供檢測服務。點擊獲取測試服務

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                  十一、哪里能獲取非損傷微測系統操作培訓服務

                  請直接聯系旭月公司獲取設備操作培訓服務。點擊此處查看培訓服務介紹

                  聯系人:巨肖宇

                  電話:010-8262 2628按3

                  十二、如何購買實驗耗材(自行檢測)

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